一、離心力的計算：
離心機的加速度通常以重力加速度（g=9.80m/s2）的倍數來表示，稱為相對離心力（RCF或“g值”）。RCF取決於轉子的轉速（n，以每分鐘轉數計r/min）和旋轉半徑（r，以mm計），可用公式表示如下：
此公式變形后，在已知r和RCF的值時可以用來計算轉速（r/min）：
然而，須留意到RCF值在離心管內並不是處處相等：在靠近轉子外側處的值最大（rmax）靠近中心軸處的值最小（rmin）。應用中，習慣上所說的RCF值都是指旋轉的均勻半徑（rav）。另外，需留意的是RCF的值是轉速值的平方的函數，因此增加41%的速度就可使RCF進步兩倍。
二、離心分離的方法：
1．差速沉降（沉澱）法：
將一混合懸浮液以一定的RCF離心一定的時間后，混合物將會被分為沉澱和上清液兩部分。從一種懸浮液中，增加RCF，以固定的離心時間連續分離沉澱的方法被廣泛應用於從細胞勻漿中分離細胞器。（a）離心前盛在離心管內的是含有大、中、小三種顆粒的懸浮液；（b）低速離心后，沉澱主要由最大的顆粒組成；（c）進一步用高速離心上清液，得到主要由中等大小顆粒組成的第二種沉澱；（d）最後一步用離心把餘下的小顆粒沉澱下來。
差速離心法主要用於分離細胞器和病毒。其優點是：操縱簡單，離心後用傾倒法即可將上清夜與沉澱分開，並可使用容量較大的角式轉子。缺點是：①分離效果差，不能一次得到純顆粒；②壁效應嚴重，特別是當顆粒很大或濃度很高時，在離心管一側會出現沉澱；③顆粒被擠壓，離心力過大、離心時間過長會使顆粒變形、聚集而失活。
2．密度梯度離心法：
區帶離心法是樣品在一定惰性梯度介質中進行離心沉澱或沉降平衡，在一定離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同區帶的分離方法。該法的優點是：①分離效果好，可一次獲得較純顆粒；②適應範圍廣，既能分離具有沉澱係數差的顆粒，又能分離有
一定浮力密度的顆粒；③顆粒不會積存變形，能保持顆粒活性，並防止已形成的區帶由於對流而引起混合。缺點：
①離心時間較長；②需要製備梯度；③操縱嚴格，不宜把握。
下列技術使用了密度梯度，即離心管中的溶液從管中的溶液從管頂到管底密度逐漸增加：
密度梯度。
（a）連續密度梯度。（b）非連續密度梯度，以遞減濃度的梯度平展疊加而形成。（c）單梯度密度屏障，設計用於選擇性的沉降一種類型的顆粒
3.差速區帶離心法：
將樣品置於平緩的預先制好密度梯度介質上，進行離心，較大的顆粒將比較小的顆粒更快地沉降
通過梯度介質，形成幾個明顯的區帶（條帶）。這種方法有時間限制，在任一區帶到達管底之前必須停止離心。差速區帶離心法僅用於分離有一定沉降係數差的顆粒，與密度無關。大小相同、密度不同的顆粒（如溶酶體、線粒體和過氧化物酶體）不能用本法分離。
離心時，由於離心力的作用，顆粒離開原樣品層，按不同沉降速率沿管底沉降。離心一定時間后，沉降的顆粒逐漸分開，最後形成一系列界面清楚的不連續區帶。沉降係數越大，往下沉降的越快，所呈現的區帶也越低。沉降係數較小的顆粒，則在較上部分依次出現。從顆粒的沉降情況看來，離心必須在沉降最快的顆粒（大顆粒）到達管底前或剛到達管底時結束，使顆粒處於不完全的沉降狀態，而出現在某一些特定的區帶內。
在離心過程中，區帶的位置和外形（或帶寬）隨時間而改變，因此，區帶的寬度不僅取決於樣品組分的數目、梯度的斜率、顆粒的擴散作用和均一性，也與離心時間有關。時間越長，區帶越寬。適當增加離心力可縮短離心時間，並可減少擴散導致的區帶加寬現象，增加區帶界面的穩定性。
4.等密度離心法：
當不同顆粒存在浮力密度差時，在離心力場下，顆粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移動到它們密度恰好相等的位置上（即等密度點）形成區帶，稱為等密度離心法。等密度離心的有效分離取決於顆粒的浮力密度差，密度差越大，分離效果越好，與顆粒的大小和外形無關。但后兩者決定著達到平衡的速率、時間和區帶的寬度。顆粒的浮力密度不是恆定不變的，還與其原來密度、水化程度及梯度溶質的同透性或溶質與顆粒的結合等因素有關。例如某些顆粒輕易發生水化使密度降低。
這種技術根據浮力密度的不同分離物質。其解析度受顆粒性質（密度、均一性、含量）、梯度性質（外形、粘度、斜率）轉子類型、離心速率和時間的影響。顆粒區帶寬度與梯度斜率、離心力、顆粒相對分子質量成正比。幾種物質可通過離心法形成密度梯度（如蔗糖、葡萄糖、菲可、尼克登）。將樣品與適當的介質混合后離心--各種顆粒在與其等密度的介質帶處形成沉澱區帶。這種方法要求介質梯度應有一定的陡度，要有足夠的離心時間形成梯度顆粒的再分配，進一步離心對其不會有影響。
可以使用一根細的巴氏滴管或帶有細長針頭的注射器來收集某個密度梯度內的條帶。另一種方法可將試管刺穿，將內容物分段逐滴收集到幾個管中。
