電泳槽常見問題解決辦法

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tags:    時間:2014-03-11 18:46:24
電泳槽常見問題解決辦法簡介
    電泳槽常見問題解決辦法<故障1>手工粘接電泳槽的鉑金電極孔處漏液該處可能是因為電泳槽工作時間較長所至,對此應使用堵漏膠(稠合液)進行封堵即可……
電泳槽常見問題解決辦法正文
    

電泳槽常見問題解決辦法
<故障1>手工粘接電泳槽的鉑金電極孔處漏液
該處可能是因為電泳槽工作時間較長所至,對此應使用堵漏膠(稠合液)進行封堵即可。
<故障2>模具水平電泳槽電極孔處漏液
檢查電極下的密封圈是否被螺絲擰緊在正確位置或已經損壞。如有損壞需更換密封膠圈。
<故障3>電泳槽有機板粘接處漏液或開膠
有機板開膠此類情況不宜發生,若發現開膠我們可以就地取材使用三氯甲烷進行局部粘接,等膠粘劑凝固后再用堵漏膠粘劑(稠合液)進行封堵即可。
<故障4>電泳槽密封條漏液(垂直槽)
一般情況下,電泳槽較窄的密封條不易漏夜,反之較寬的則比較容易漏,此時先檢查:
1、密封條是否老化或損壞,若已經老化或損壞,應更換密封條。
2、如果密封條完好無損,目測檢查密封條是否有凹凸不平現象,如果有應將密封條拆下進行重新安裝。安裝時注意不要拉扯密封條,使其自然地嵌入密封槽內,並保證安裝均勻,避免密封條出現凹凸現象。
3、如果緩衝液是從密封條的中間漏出,則說明漏處比兩邊凹(不在同一水平線上),我們則需要把密封條拆下,清理乾淨槽內膠粘劑,然後再將薄厚相當的窄邊條(如0.4毫米)粘在槽內,以墊起凹下的密封條,使其與兩邊保持一致,此後再將密封條粘在槽內即可。
<故障5>電泳槽內無電流(鉑緊電極上無氣泡)
1、首先利用萬用表檢查電泳儀有無輸出電壓(注意選擇直流電壓擋,輸出不得超過量程,以免損壞萬用表)
2、利用萬用表電阻擋檢查電泳輸出線是否導通。
3、利用萬用表電阻擋檢查電泳槽電極插座與鉑金絲之間是否可靠導通,重點檢查輸出插座與插頭是否與連接鉑金絲的焊片緊密連接,如發現鬆動請使用尖嘴鉗將其緊固即可,完畢進行檢測若還沒有電流則檢查鉑金絲是否斷裂,若鉑金絲有斷裂跡象則用電烙鐵將其焊接,首先將助焊劑塗在鉑金絲上再用電烙鐵粘上焊錫將斷裂的兩段鉑金絲焊連即可。

<故障6>鋁扳散熱效果不佳
先檢測鋁板與玻璃板之間有無縫隙,若有縫隙首先應緊固螺栓,如果經堅固螺栓仍無法使鋁板與玻璃板帖平,可將鋁板拆下清理上面的污垢,根據縫隙的大小用相應厚度的墊片將鋁板墊起,並保證鋁板的四邊平整(墊平后的鋁板平面應低於密封條3-4毫米)。

五、常見問題及解決辦法
1、紋理和托尾現:由於樣品溶解不佳引起的,克服的方法可以在加樣前離心,增加一些增溶輔助試劑如尿素。
2、蛋白帶過寬,與鄰近泳道的蛋白帶相連時由於加樣量太多,可以減少上樣量。
3、電泳時間比正常要長。可能由於凝膠緩衝系統和電極緩衝系統的PH選擇錯誤,即緩衝系統的PH和被分離物質的等電點差別太小,或緩衝系統的離子強度太高。
4、指示劑成微笑符號(指示劑前沿呈現向上的曲線形),說明凝膠的不均勻冷卻,中間部分冷卻不好,導致分子有不同的遷移率所致。
5、指示劑成哭臉符號(指示劑前沿呈現向下的曲線形),由於電泳槽的裝置不合適,尤其是凝膠和玻璃板組成的「三明治」底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不完全。
6、凝膠時間不對。通常膠在60min,1H內凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS劑量不夠或者失效。APS應該現配現用,TEMED不穩定,容易被氧化成黃色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。

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