品紅亞硫酸鈉培養基化學性質、使用方法及用途

tags:    時間:2014-03-11 11:11:02
品紅亞硫酸鈉培養基化學性質、使用方法及用途簡介
     名稱:品紅亞硫酸鈉培養基品紅亞硫酸鈉培養基化學性質: 乳糖發酵的細菌產生乙醛,在存在鹼性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結合形成紅色菌落,快速發……
品紅亞硫酸鈉培養基化學性質、使用方法及用途正文
    

名稱:品紅亞硫酸鈉培養基

品紅亞硫酸鈉培養基化學性質:

乳糖發酵的細菌產生乙醛,在存在鹼性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結合形成紅色菌落,快速發酵乳糖的細菌產生金屬光澤,不發酵乳糖的細菌形成無色透明的菌落。蛋白腖、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、維生素和礦物質;乳糖為可發酵的糖類;瓊脂是培養基的凝固劑;磷酸氫二鉀為緩衝劑;亞硫酸鈉能將鹼性品紅還原,使其褪色,發酵乳糖的細菌產生乙醛,與亞硫酸鈉和鹼性品紅生成紅色菌落。

品紅亞硫酸鈉培養基用途:用於水中大腸菌群的分離或確證試驗。(GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。

品紅亞硫酸鈉培養基使用方法:
1、稱取本品54.5g,加入蒸餾水或去離子水1L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌20min,冷至50℃左右,傾注無菌平皿,備用。

2、濾膜滅菌:將孔徑為0.45μm的濾膜放入燒杯中,加入蒸餾水或去離子水,置於沸水浴中煮沸滅菌三次,每次15min。前兩次煮沸后需更換水洗滌2-3次,以除去殘留溶劑。

3、濾器滅菌:用點燃的酒精棉球,火焰滅菌。也可用121℃高壓滅菌20min。

4、過濾水樣:用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分,將粗糙面向上,貼放在已滅菌的濾床上,固定好濾器,將100mL水樣(如水樣含菌較多,可減少過濾水樣量,或將水樣稀釋)注入濾器中,打開濾器閥門,負0.5大氣壓下抽濾。

5、培養:水樣抽濾完后,再抽氣約5S,關上濾器閥門,取下濾器,用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分,移放在品紅亞硫酸鈉培養基上,濾膜截留面向上,濾膜應與培養基完全貼緊,兩者間不得留有氣泡,然後將平皿倒置,放入36±1℃恆溫箱內培養22-24h。

6、觀察結果:挑出符合下列特徵菌落進行革蘭氏染色、鏡檢。
紫紅色,具有金屬光澤的菌落。
深紅色,不帶或略帶金屬光澤的菌落。
淡紅色,中心色較深的菌落。


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