液相色譜儀的基本原理應用及常見故障
高效液相色譜儀的應用高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的範圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。
與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離複雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於HPLC具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展很快，如在環境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發烴類，使環境污染分析得到新的發展。
高效液相色譜儀常見故障處理LC-10AT高效液相色譜儀是日本島津公司1996年的產品，檢測器為可變波長紫外檢測器，色譜柱為島津公司的ODS-C18，大連依利特的ODS-C18。
八年的日常工作中遇到了幾種故障，如故障1經諮詢島津公司的工程師后，得以解決;故障2、故障5是頻繁碰到的問題等，特作總結如下:故障1流動相內有氣泡，關閉泵，打開泄壓閥，打開purge鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。
原因過濾器長期沉浸於乙酸銨等緩衝液內，過濾器內部由於黴菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩衝液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。
處理過濾器浸泡於5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡於5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵，清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續將過濾器浸泡於5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內部的黴菌菌團已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗乾淨。關閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時即可。
故障2柱壓高原因(1)緩衝液鹽分如(乙酸銨等)沉積於柱內;(2)樣品污染沉積。
處理對於第一種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之後用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對於第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然後換成甲醇沖洗，接著用甲醇異丙醇(4 6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然後用純水沖洗，最後甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
故障3既無壓力指示，又無液體流過[1>。
原因(1)泵密封墊圈磨損;(2)大量氣泡進入泵體。
處理對於第一種情況，更換密封墊圈;對於第二種情況，在泵作用的同時，用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
故障4壓力波動大，流量不穩定.原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。
處理工作中注意觀察流動相的量，保證不鏽鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣[2>。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗.故障5出峰不佳，峰分叉。
原因(1)色譜柱被污染;(2)柱頭填料塌陷。
處理對於第一種情況，先用純水反向沖洗柱子，然後換成甲醇沖洗，接著用甲醇異丙醇(4 6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然後用純水沖洗，最後甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對於第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內徑相同的頂端平滑的不鏽鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反覆幾次，直至裝滿填平[2>。柱頭用甲醇沖洗乾淨，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。
故障6峰面積重複性不佳。
原因(1)進樣閥漏液;(2)加樣針不到位。
處理對於第一種情況更換進樣閥墊圈;對於第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態轉換到INJECT狀態，以保證進樣量的準確。日常工作中，液相色譜儀的保養非常重要，如要注意不要讓空氣進入輸液系統和高壓泵中，儲液器內的溶液如長時間未用應清洗儲液器並更換溶液，每次用完色譜儀后緩衝液要用純水沖洗乾淨，防止無機鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要，任何樣品都要儘可能地去除雜質，完全溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞;色譜柱作好標記，用於不同分析目的的色譜柱不要混用等。
